Введение. Разработка новых способов объективной диагностики успешности приживления аутотрансплантатов имеет важное значение для апробирования и совершенствования новых методов оперативной помощи людям пожилого возраста, разрабатываемых в экпериментальной хирургии. Мониторинг в режиме реального времени за состоянием аутотрансплантатов селезенки у пациентов пожилого возраста является еще более сложной задачей, поскольку для этой возрастной категории характерны высокие значения индекса полиморбидности [1, 4].
Удаление селезенки сопровождается развитием гнойно-септических и коагуляционных осложнений, формированием постспленэктомического синдрома (ПСЭС), изменений в иммунной системе и эритроне. Для профилактики ПСЭС, в настоящее время, широко применяют метод аутотрансплантации ткани селезенки (АТТС) в большой сальник, преимуществом которого является техническая простота, высокая физиологичность операции, надежность гемостаза.
Единый алгоритм АТТС еще не разработан. Поэтому изучение процесса приживления аутотрансплантатов (АТ) под влиянием различных факторов требует наличие метода динамического наблюдения в ближайшем и отдаленном послеоперационном периодах.
Цель исследования: разработка способа диагностики приживления АТселезенки, пересаженного в большой сальник в эксперименте.
Материалы и методы: Аутотрансплантацию селезёнки провели 20 крысам линии Wistar обоего пола, массой 160-180 г. Под эфирным рауш-наркозом через верхнесрединную лапаротомию, удаляли селезёнку, помещали ее на влажную салфетку, из центральной части органа иссекали два фрагмента толщиной 1-2 мм по площади равные поперечнику органа, помещали в карман, сформированный из дупликатуры нижней левой части большого сальника, который фиксировали отдельными кетгутовыми швами.
На 3, 7, 14, 30 сутки послеоперационного (ПО) периода под эфирным рауш наркозом через средне-срединный разрез длинной 1 см при помощи игольчатых электродов проводили биоимпедансометрию (БИМ), частота тока 10 кГц, напряжение в цепи 1,020 V, Z=U2× R/U1, где Z – импеданс, U2 – напряжение на вольтметре V2, U1 – напряжение на вольтметре V1, R – сопротивление резистора R1, равное 10 Ом.
Измеряли импеданс ткани большого сальника в двух зонах: на расстоянии не более 3 мм от АТ (Z1), и на периферии, около желудка, на расстоянии не более 5 мм от большой кривизны (Z2). Также проводили БИМ ткани аутотрансплантата, пересаженного в большой сальник [2, 3, 5].
Затем производили забой животных. Для гистологического исследования брали участок сальника с аутотрансплантатом. Материал фиксировали 10% раствором нейтрального формалина, заливали в парафин, приготавливали ультратонкие срезы и окрашивали гематоксилином и эозином.
Результаты исследования и их обсуждение. При исследовании БИМ большого сальника (табл. 1) на 3 сутки ПО периода Z1=86,5±6,5, а Z2=114,4±8,5 (р0,01) на 7 сутки Z1=107,3±2,8, Z2 =127,8±7,1 (р0,05), далее показатели импеданса достоверно выравнивались и соответствовали Z1=182,4±8,5, Z2=182,7±8,3 на 14 сутки и Z1=203,0±0,1, Z2=203,4±0,2 на 30 сутки.
Исследование показателей импеданса ткани АТ показало, что на 3 сутки импеданс АТ был минимальный. В последующие сутки наблюдения сопротивление увеличивалось и приближалось на 30 сутки к показателям интактной селезенки.
По данным гистологического исследования в АТ селезенки на 3-7 сутки ПО периода происходили процессы некробиотического характера, которые, по видимому, и обусловили снижение импеданса.
В последующие сутки АТ представлял собой конгломерат, состоящий из ткани селезёнки, жировой и соединительной ткани, а также поджелудочной железы. При этом капсула АТ была выражена слабо. Вокруг АТ имелась обильная перифокальная лейкоцитарная инфильтрация. Во всех наблюдениях определялась красная пульпа с полнокровными синусами, в которых негемолизированные эритроциты преобладали над лейкоцитами.
На 30 сутки в АТ наблюдалась тенденция к формированию белой пульпы в виде мелких, незрелых, редко расположенных лимфоидных фолликулов. Паренхима АТ была инфильтрирована лейкоцитами, по периферии выявлялись гемосидерофаги, а местами тучные клетки. Наблюдался процесс врастания капилляров в АТ de novo.
Таким образом, гистологическая картина приживления АТ в динамике наблюдения полностью соотносилась с изменениями импеданса АТ, т.е. его нарастание до показателей интактной ткани.
Заключение. Способ БИМ аутотрансплантата селезенки и большого сальника,является объективным, надежным, простым в исполнении, малоинвазивным и позволяет диагностировать его приживление.
Данный способ может быть широко использован в экспериментальной хирургии для изучения динамики процесса приживления трансплантатов.
Список литературы.
-
Ильницкий А.Н. Старческая астения (frailty) как концепция современной геронтологии / А.Н. Ильницкий, К.И. Прощаев // Геронтология. – 2013. – № 1; URL:
gerontology.esrae.ru/ru/1-2 (дата обращения: 26.10.2014).
-
Кузин М.И. Аутотрансплантация ткани селезёнки после спленэктомии / М.И. Кузин, М.В. Данилов, И.Д. Скуба и [др.]. // Клиническая медицина. – 1985. - № 3. – С. 34 - 39.
-
Леонов С.Д., Федоров Г.Н. Способ ранней диагностики приживления аутотрансплантатов селезенки // Патент России № 2325846.
-
Прощаев К.И. Молекулярные основы развития и прогрессирования хронической сердечной недостаточности в пожилом и старческом возрасте / К.И. Прощаев, А.Н. Ильницкий, В.И. Бессарабов, Т.В. Павлова, Т.В. Кветная, О.А. Болховитина, Н.М. Позднякова // Молекулярная медицина. - 2012. - № 6. - С. 60-63.
-
Федоров Г.Н., Леонов С.Д. Способ ранней диагностики приживления аутотрансплантатов селезенки в большой сальник // Патент России № 2328214.