Введение
Частота онкологических заболеваний у человека по мере старения увеличивается, о чем свидетельствуют данные многочисленных исследований. При этом, от злокачественных новообразований в возрасте 20-29 лет умирает 11,9 мужчин на 100 тыс. человек, в то время как в возрасте 60 лет — 963,4 [1, 5]. Между 20 и 65 годами в жизни человеческой популяции частота рака увеличивается почти в 100 раз. Среди лиц старше 60 лет распространенность всех новообразований превышает соответствующий показатель у людей младше 40 лет в 16,5 раза у мужчин и в 6,7 раза у женщин [2]. Таким образом, по мере старения, закономерно, хотя и с различной скоростью, возникают нарушения гомеостаза и накапливаются повреждения на уровне клеток и тканей, обусловленные действием как внешних, так и внутренних повреждающих факторов, что в сумме и увеличивает частоту возникновения рака [2, 5]. Появление современных высокотехнологичных методов исследования и обработки данных открывает новые возможности для научных достижений. Примером тому является изучение биологических материалов с помощью электронной микроскопии, что неоспоримо расширяет границы в исследовании человеческого организма [3, 4]. Исследование крови с помощью данного метода позволяет получить более полную информацию о характеристике её компонентов. Эритроциты несут ряд важных для организма функций, одной из которых является транспорт кислорода и углекислого газа и т.д. [4, 6]. Отражение изменений гомеостаза на форме, размере, объеме эритроцитов представляет научный и практический интерес, так как позволяет более глубоко изучить патогенез заболеваний, а также дает возможность предположить наличие патологии по вышеуказанным параметрам. Проведенные ранее исследования в этой области указывают на достоверные изменения формы эритроцитов у онкологических больных [3, 7].
В связи с увеличением заболеваемости и смертности больных со злокачественными новообразованиями, а так же прогресс в создании новых методов исследования и внедрение их в медицинскую практику, данный вопрос представляет собой наибольшую актуальность и требует дальнейшего изучения в этой области.
Цель исследования
Провести аналитическое исследование эритроцитов при помощи растровой электронной микроскопии с использованием методов математической статистики.
Материал и методы исследования
Исследование проводилось на базе онкологического диспансера г. Белгород. На данном этапе были обследованы 15 пациентов, из них 10 онкоурологических больных и 5 человек составляли контрольную группу. Для растровой электронной микроскопии изучаемые эритроциты промывали при 37° в изотоническом растворе натрия хлорида (NaCI 0,9%). Приготовленные образцы крови просматривали в растровом электронном микроскопе «FEI Quanta 200 3D» (Голландия). Учитывая, что средняя величина объема эритроцитов (средний корпускулярный объем - MCV) не является показательной величиной при онкоурологических заболеваниях – наибольший интерес представляет распределение эритроцитов по размерам. Ввиду того, что измерение всех линейных размеров эритроцита представляет собой определенные сложности, аналитически вычислить распределение по объему большого количества эритроцитов не представляется возможным. Однако, можно допустить с точностью до константы, что MCV ~ L3, где L – средний измеренный линейный размер эритроцита. В качестве измеряемого линейного размера эритроцита был выбран средний диаметр эритроцита, измеряемый при помощи растрового электронного микроскопа «FEI Quanta 200 3D» при увеличении 5000 и ускоряющем напряжении 20 кВ.
Измеренные эритроциты были представлены группами с шагом 0,4 мкм. На данном этапе статистическая выборка составляет 30±5 эритроцитов на пациента. Достаточность выборки определяется тем, что нормальное распределение имеет формулу: нормоциты (7,1 – 7,9 мкм)– 75%; макроциты (более 8 мкм) - 12,5%; микроциты (менее 6 мкм) - 12,5%. Обработка экспериментальных данных проводилась при помощи математического пакета OriginPro 6.1.
Результаты исследования и их обсуждение
Аналитическое исследование эритроцитов методом математической статистики выявило несколько интересных фактов. Во первых: распределение эритроцитов, как и ожидалось, имеет вид одиночного пика. Положение, форма, а также ширина на полувысоте данного пика содержат в себе ценную информацию о протекающих в организме патологических процессах. Так, у группы больных со злокачественными новообразованиями предстательной железы отмечается смещение пика в вправо по оси Х (рисунок 2), что говорит о макроцитозном смещении, при этом среднее значение линейного размера составляет 8,21±0,01 мкм. В то время как у группы больных со злокачественными новообразованиями почки наблюдается уширение пика, при среднем значении линейного размера 7,83±0,01 мкм. В обоих случаях значения MCV и среднего размера эритроцита в пределах нормы, однако отчетливо видно, что на самом деле имеют место значительные отклонения от нормы (Рисунок 2). На данном этапе исседования, к сожалению, трудно говорить о каких либо достоверных закономерностях, учитывая небольшой объем выборки пациентов, что приводит к довольно высокой ошибке, которая в данном случае приводит к ошибке порядка 28%. Однако, предварительные результаты представяют собой интерес, что позволяет продолжить исследования в данном направлении.
Заключение
Таким образом, на данном этапе нами было установлено, что информация о распределении эритроцитов по размеру у онкоурологических больных является потенциальным диагностическим показателем.
Список литературы.
- Ворошилова И.И. Ожидаемая продолжительность жизни, смертность и инвалидность в оценке качества жизни пожилых людей / И.И. Ворошилова, Р.С. Пархоменко, В.Н. Ефанов // Клиническая геронтология. - 2009. - № 12. - С. 9 - 12.
- Кишкун А.А. Биологический возраст и старение: возможности определения и пути коррекции: Руководство для врачей. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2008. – 976 с.
- Павлова Т.В., Позднякова Н.М., Прощаев К.И. Возможности изучения морфофункцио-нальных свойств эритроцитов в диагностике предболезней // Медицинская наука и клиническая практика на Харьковщине: прошлое, настоящее, будущее: тезисы конференции, посвященной 150-летию Харьковского медицинского общества. ( Харьков, 30 ноября, 2011 г.). - Харьков, 2011. – 54 с.
- Павлова Т.В. Исследование крови с помощью наноструктурных морфологических методов / Т.В. Павлова, К.И. Прощаев, С.А. Сумин, В.А. Петрухин, И.С. Сырцева, А.В. Селиванова, М.А. Чаплыгина // Научные ведомости Белгородского государственного университета. - 2012. – Т. 141, № 22. – С. 19 - 23.
- Свиридова С.П. Интенсивная терапия больных пожилого и старческого возраста в онкохирургии / С.П. Свиридова, С.А. Чухнов, С.В. Мостовой // Клиническая геронтология. - 2007. - № 10. - С. 16 - 25.
- Селиванова А.В. Особенности течения беременности и родов у женщин с артериальной гипертензией / А.В. Селиванова, Т.В. Павлова // Научные ведомости Белгородского государственного университета. – 2008. - Т. 46, № 6. - С. 64 – 66.
- Pavlova T.V. Development of endothelial dysfunction in system mother-placenta-fetus at hypertensive disease in gravidae / T.V. Pavlova, A.V. Selivanova // European journal of natural
history. - 2008. - № 4. – 52 p.